Abstract
يعتبر فيروس كورونا-٢ المسبب للمتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة، هو العامل المسبب لمرض فيروس كورونا-٢٠١٩، يمكن أن يؤدي إلى مرض تنفسي حاد. المرضى الذين يعانون من أمراض مصاحبة أساسية لديهم مخاطر عالية للإصابة بمرض فيروس كورونا-٢ المسبب للمتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة. الفحوصات المصلية مطلوبة بشكل عاجل لتشخيص الحاملين للمرض من غير أعراض ظاهرة، وتقدير انتشار العدوى والوقاية من المرض ومكافحته. لذلك كان الهدف من هذه الدراسة هو تطوير الفحص المناعي المرتبط بالإنزيم (إليزا) للكشف عن وجود الأجسام المضادة الناتجة عن الإصابة بفيروس كورونا-٢ المسبب للمتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة عند البشر.
تم تصميم وتأسيس اختبار مصلي بطريق الإليزا للكشف عن الأجسام المضادة ضد فيروس كورونا -٢ المسبب للمتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة حسكة البروتين من عينات المصل المأخوذة لمرضى فيروس كورونا-٢٠١٩ منومين تأكدت إصابتهم بالفيروس بواسطة تفاعل البلمرة المتسلسل. اُستخدم ٤٢ مصلا من مرضى تماثلوا للشفاء كعينات تحكم إيجابية، بينما استخدمت ١١٧عينة مصل لما قبل الجائحة كعينات تحكم سلبية.
أظهرت مقارنة بين بروتينات مختلفة لفيروس كورونا -٢ المسبب للمتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة أن الطول الكامل لحسكة البروتين كان لها أقوى تفاعل للأجسام المضادة لفيروس كورونا -٢ المسبب للمتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة في عينات مصل المرضى بالمقارنة بالوحدات الفرعية ١ والوحدة ٢. بالإضافة لذلك، كانت المقايسات حساسة بحيث يمكن اكتشاف الأجسام المضادة بتركيزات منخفضة للغاية.
كان الفحص الحالي محددا ولم يتفاعل مع فيروس كورونا سارس الآخر أو فيروسات الجهاز التنفسي الأخرى كفيروس الإنفلونزا. بالإضافة لذلك، كان لديه حساسية عالية وكان الاختبار له قدرة لتحديد الأجسام المضادة بتركيزات منخفضة للغاية. ويعتبر هذا الاختبار كطريقة فرز واعدة على مستوى السكان ولإجراء دراسات وبائية مصلية مستقبلية.
Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), the causative agent of coronavirus disease 2019 (COVID-19), can lead to severe respiratory illness. Patients with underlying comorbidities have a high risk of contracting COVID-19. Therefore, serological assays are urgently needed to diagnose asymptomatic carriers of SARS-CoV-2, to estimate the prevalence of infection, and for disease prevention and control. This study aimed to develop an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of anti-SARS-CoV-2 antibodies in humans.
An ELISA test was designed and established to detect antibodies against the SARS-CoV-2 spike protein in serum samples from 41 quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) - positive hospitalised COVID-19 patients. Forty-two convalescent patients' sera served as positive controls, while 117 pre-pandemic serum samples were used as negative controls.
A comparison between different SARS-CoV-2 proteins was performed, which included the full-length spike (S) protein and the S1 and S2 subunits. The full-length S protein showed the strongest reactivity for anti-SARS-CoV-2 IgG antibodies in patients' serum samples. Additionally, since antibodies could be detected at very low concentrations, the assay was found to be sensitive.
The current assay was specific, since cross-reactions with other SARS coronaviruses and respiratory viruses such as influenza were not found. Additionally, it was highly sensitive, since the test was able to identify antibodies even at very low concentrations. Therefore, this assay has promise as a screening method at the population level and may be used for in future seroepidemiological studies.